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活性氧/自由基

二氫乙錠

產(chǎn)品編號:R0104       CAS#:       Ex (nm):518 Em(nm):            分子式: 分子量:R0104        溶劑:DMSO        包裝:25 mg 供貨狀態(tài):3-5天        儲存條件:低溫避光-20 零售價(jià)格: 1236.00

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產(chǎn)品描述

二氫乙錠可有效地作為測量活性氧物質(zhì)的探針。染料自由進(jìn)入細胞并脫氫成溴化乙錠。該探針已被廣泛用于NK細胞,并作為鑒定腫瘤中增殖和缺氧細胞的重要染料。已經(jīng)使用嗜中性粒細胞和內皮細胞以及HL60細胞和巨噬細胞進(jìn)行了研究。該探針的主要優(yōu)點(diǎn)是能夠區分超氧化物和H2O2,熒光發(fā)射發(fā)生在約600nm處。

 

產(chǎn)品編號

產(chǎn)品名稱(chēng)

規格

價(jià)格

R0104

二氫乙錠

25mg

1236RMB


用于染色細胞的樣品方案

以下過(guò)程提供了一般準則,實(shí)際情況應根據您的特定實(shí)驗進(jìn)行修改。

1.制備5-10 mM DMSO儲備溶液。應將未使用的DMSO儲備溶液等分到單次使用的小瓶中并儲存在-20℃,避光。

2.在生理緩沖液(如PBS,HBSS,HEPES)中使染料的工作濃度為5-20μM。最佳工作濃度必須根據經(jīng)驗確定。

3.將染料工作溶液(來(lái)自步驟2)等體積(例如100μL細胞在生長(cháng)培養基中)加入細胞中,并在室溫或37℃下孵育細胞5至60分鐘。

4.在將細胞暴露于實(shí)驗誘導物之前,確定負載細胞樣品的基線(xiàn)熒光強度。

5.陰性對照應評估如下:

5.1檢查有沒(méi)有誘導物的染料和緩沖液/培養基的無(wú)細胞混合物的熒光。 在沒(méi)有細胞外酯酶和其他氧化酶的情況下,熒光隨時(shí)間的逐漸增加可能會(huì )自發(fā)水解,導致水解的原因可能與大氣氧化或光誘導氧化有關(guān)。

5.2檢查已經(jīng)保持在生長(cháng)培養基或緩沖液中的未處理(對照)負載細胞的熒光。在健康細胞中,氧自由基被細胞酶和天然抗氧化劑消除。 在染料加載結束后,健康細胞應表現出低水平的熒光,在實(shí)驗期間相對穩定; 可以觀(guān)察到熒光的逐漸增加(由于自動(dòng)氧化)或減少(由于細胞中的染料損失或光漂白)。在沒(méi)有任何刺激或誘導的情況下,健康的未經(jīng)處理的細胞中的熒光突發(fā)可以指示細胞死亡或一些其他氧化事件的進(jìn)展。

6.可以用叔丁基過(guò)氧化氫(TBHP)刺激陽(yáng)性對照至終濃度~100μM(基于細胞的敏感性和反應增加或減少劑量而定)。



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